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本试剂盒用于Western blot的化学发光检测，比普通超敏型ECL显色法灵敏度更高，10^-15g级检测水平。原理是采用新型发光底物(Luminol)，其与辣根过氧化物酶反应时产生很强的光信号，在暗房中对X-光片感光，以此检测微量蛋白而获得理想的实验结果。

本试剂盒在ECL检测液的基础之上加以改进，具有灵敏度高，持续时间长的特点，同时试剂盒的稳定性也有很大的提高。

1. 印迹膜制备
   按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作，接着封闭过夜，加入一抗，室温振荡1h，用PBST洗涤四次，每次10min；然后加入HRP二抗交联物，室温振荡1h，用PBST洗涤四次，每次10min。
   
2. ECL工作液的配制
   取1.5mL的eppendorf管，然后加入500μL Stock A液和500μL Stock B液，混合后即为ECL工作液(配制后请尽快使用)。将膜片平铺，滴加ECL工作液使其将膜片完全覆盖(每平方厘米膜片至少使用0.1mL ECL工作液)。
   
3. 蛋白信号显现
   
   1. 用平头镊钳住膜片，垂直置于吸水纸以吸去过量试剂。
      
   2. 置膜片于二层保鲜膜之间，小心赶尽气泡。
      
   3. 将膜片吸附蛋白面朝上，置于X光片盒中。
      
   4. 于暗室中压上X光片。
      
   5. 曝光：如果在暗室中可肉眼看到比较亮的条带，建议曝光1分钟～3分钟；如果肉眼看到的带比较淡，建议曝光3～10分钟；如果很淡或基本看不到带，建议曝光10分钟～30分钟。最后可以根据结果调节曝光时间，再次曝光显影。